کشت بافت در آشپزخانه:
- این روش تکثیر میتواند در محیط آشپزخانه، با استفاده از مایکروفر(یا مایکرویو) برای استریل کردن مواد، PPM (ضد آفت) ، بایوساید، برای کم کردن آلودگی و همچنین محفظه ای جعبه ای برای جلوگیری از ورود آلودگی و گردوغبار انجام شود.
- مواد مخصوص کشت بافت میتواند از قبل خریداری شود اما با کمی تجربه و حوصله میتوان به روشی که در ادامه بحث میشود آنرا ساخت.
- بعضی از مواد شیمیایی بدست آوردنش از گلخانه ها مشکل است، مثل benzylaminopurine و isopentyladenine . اما مقدار کم آن قابل خریداری است هرچند بعضی از گیاهان برای کشت نیازی به آنها ندارند.
درشکل زیر مواد نمونه ای از این کار را نشان میدهم:
سوالات مهم قبل از معرفی مواد،
برای کشت بافت از چه چیزی به جای لوازم آزمایشگاهی و لوله های تست استفاده کنم؟
ظرف های مربا یکی از بهترین انتخاب ها هستند. آنها را با استفاده از زودپز و یا مایکروفر استریل کنید. نگهدارنده های غذای کوچک نیز انتخاب مناسبی است.چگونه میتوانم آب را استریل کنم؟
از آب فیلتر شده و یا همان آب لوله کشی استفاده کنید اما به مدت 10 دقیقه در مایکروفر و یا 20-30 دقیقه در زودپز قرار دهید.چگونه میتوانم medium را درست کنم؟ از کجا بدانم هر گیاه چه نوع مدیومی لازم دارد؟
در ادامه روش دست ساز معرفی میشود. انتخاب میزان غلظت و نوع مدیوم برای هرگونه نیازمند سرچ و مطالعه کارهای انجام شده و کمی سعی و خطا است.برای استریل لوازم مثل چاقو وانبر از چه چیزی استفاده کنم؟
میتوانید از الکل و یا ایزوپرپانول استفاده کنید.طرز ساخت مدیم:هنگامی که کشت آغاز شد گیاهان را در کجا قرار دهم؟
در محفظه ای با دمای 25 درجه و 16 ساعت نوردهی با لامپ فلوئورسنت سفید سرد (5500-8000 کلوین)
نور باید در ارتفاع 9-12 اینچی شیشه ها باشد. هرگز آنهارا در کنار پنجره و نور مستقیم آفتاب قرار ندهید.
روش خریداری شده:
- پیکیج MS مدیم
- دو قاشق غذاخوری شکر
- 1 میلی لیتر PPM
- َAgar (اغلب آزمايشهاي كشت بافت برروي بستري ثابت صورت مي گيرد و به طور معمول از يك عامل مولد ژل
جهت اين كار استفاده مي شود . اين عامل مولد ژل مي تواند آگار (تهيه شده از نوعي جلبك دريايي)، ژلرايت
(پلي ساكاريدي كامل از تخمير گونه اي پسودوموناس) و يا فايتوژل (حاصل تخمير آگار توسط گونه اي
پسودوموناس) باشد.)- آب استریل شده
- سرکه و قرص ضد اسید برای تنظیم PH
- هرمون (دل به خواهی)
روش دست ساز:
- یک قاشق چای خوری کود شمیایی به صورت 20-20-20 (N-P-K)
- دو قاشق غذای خوری شکر
- یک قرص مولتی ویتامین (آنرا خورد نکنید، بذارید آرام آرام حل شود و بعد از مدتی آنرا خارج کنید)
- یک میلی لیتر PPM
- Agar
- آب استریل شده
- سرکه و جوش شیرین برای تنظیم PH
- هرمون(دل به خواهی)
طرز ساخت:
- به اندازه ی سه پیمانه به ظرف های معمول مربا آب استریل شده بریزید
- مدیوم MS و یا کود شیمیایی را ریخته و سپس دو قاشق غذایخوری شکر بریزید و خوب هم بزنید
- با احتیاط و استفاده از دستکش از PPM و هرمون استفاده کنید. آب ظرف را به حدود 1 لیتر برسانید
- PH را تست کنید. 5.5 تا 6 مورد نیاز است. اگر خیلی اسیدی است از جوش شیرین استفاده کنید. اگر خیلی بازی است از چند قطره کوچک (با قطره چکان) سرکه استفاده کنید. سپس دوباره تست کنید و این کار را آنقدر انجام دهید که به رنج مناسب برسید.
- 3 قاشق غذا خوری از این را در ظروف مربا خوری کوجک برای کشت قرار دهید(بهتر است قاشق پلاستیکی باشد)
- سپس ظروف را بسته و در حدود 3 دقیقه در مایکروفر و یا 20 دقیقه در زود پز قرار دهید.
در ادامه روش ضدعفونی کردن و مثال های انجام شده را بحث خواهیم کرد
ترجمه : DarKfish
منبع :http://www.kitchenculturekit.com توسط دکتر Carol M. Stiff
اختصاصی از امروزی
به انجمن امروزی خوش آمدید لطفا وارد شوید یا ثبت نام کنید
